Spark：IdeS或能解决AAV载体基因疗法疗效下降和复用问题

昨日（6月1日），在佰傲谷发布的《疗效再下降，BioMarin血友病基因疗法更新数据》一文中提到，BioMarin CEO曾表示，即使疗效耗尽，新技术也可能让再次基因疗法再次给药成为现实。

无巧不成书，昨日，BioMarin血友病基因疗法主要竞争对手之一，另一基因疗法主要玩家Spark Therapeutics在Nature: Medicine上发表了题为“IgG-cleaving endopeptidase enables in vivo gene therapy in thepresence of anti-AAV neutralizing antibodies”文章，为解决腺病毒载体（AAV）基因疗法所面临的由AAV抗体所导致的疗效下降和难以重复用药等问题，提供了新的潜在解决方案。

Spark表示，使用IgG降解酶IdeS进行治疗，可以迅速且短暂的消除抗AAV IgG，从而恢复基因疗法的效果。

AAV基因疗法的挑战

AAV的普遍流行导致AAV中和抗体广泛存在于人群中。据了解，人群中AAV中和抗体的血清阳性率可观，AAV1, 2, 5, 6, 8, 9分别在大约67%，72%，40%，46%，30%和47%的健康人中呈阳性。

AAV中和抗体的高阳性率和其阻断肝脏转导和载体再调节的作用，很大程度上影响了以AAV为载体的基因疗法的效果，是基因疗法的主要限制之一。除此之外，基因治疗后，高滴度的抗AAV抗体出现并且长期存在，给基因疗法的再次给药提出了严峻挑战。

目前，为了解决这一问题，许多研究都选择运用免疫抑制来克服抗AAV抗体这一策略，但这类办法在清除已存在的抗体方面效率不高。

IdeS短暂清除抗体是AAV载体基因疗法的完美搭档

Spark Therapeutics的CSOFederico Mingozzi表示：“我试着对AAV的免疫反应进行分层，而抗体就是第一层，是实现基因转导时遇到的第一个障碍。”

本研究中，研究人员们探索了利用从化脓性链球菌中提取的IgG降解酶作为一种策略来解决AAV中和抗体的局限性。Imlifidase（IdeS）是一种内肽酶，可以在短暂时间内将人IgG裂解为F(ab‘)2和Fc片段，这一点在抗体介导的移植物排斥反应和肝素诱导的血小板减少临床研究中得到了验证。

对此，Mingozzi表示，IdeS优秀的安全性和短暂的抗体分解作用对基因疗法来说是完美的。“基本上，你所需要的是一段可以注射载体并让载体到达目标组织的时间。一旦载体进入细胞就不受抗体的影响了，这段时间通常只有几小时”，Mingozzi说。

在Spark的研究中，研究人员首先发现在被动静脉注射Ig的小鼠中，IdeS可以降低抗AAV抗体的水平并使转基因表达和肝脏基因转导显著增加。

IdeS可降解AAV抗体，并使被动免疫IVIg小鼠肝转导成功

之后，该方法被扩展到非人类灵长动物，即野生型AAV的自然宿主，研究人员发现在进行AAV载体注射前（携带因子IX基因的AAV8载体）进行IdeS治疗是安全的，并且观察到再次注射AAV载体也可以增强肝脏转导。

预先存在AAV抗体的非人灵长类动物中，IdeS治疗可以增强转导作用

IdeS治疗使得非人灵长类动物再次接受AAV-LK03载体成为可能

最后，研究人员们在人血浆样本的实验中也观察到了同样的效果，这些样本包括了基因疗法试验参与人员的血浆。

IdeS对人血浆中IgG的高效裂解

Mingozzi表示：“IdeS不仅对已存在的抗体起作用，也会对载体给药后新产生抗体起作用，这一发现十分令人惊讶，因为后者有望激发显著而持久的疗效。”

基因疗法复用一直是研究人员们所希望攻克的难题。原因是，现有的基因疗法疗效可能随着时间的推移而减弱，这个问题对于在婴儿期就接受治疗的患者来说至关重要。Spark希望，这项技术能扩展AAV载体基因疗法的可能性。据了解，Spark已经围绕IdeS的特殊用途申请了专利。临床前研究，包括GLP毒理研究正在推进中。届时Spark基因疗法研发团队将与监管机构共同讨论，如何重新设计和评估纳入了AAV抗体阳性患者的临床研究。

原文参考：IgG-cleaving endopeptidase enables in vivo gene therapy in the presence of anti-AAV neutralizing antibodies